Kit de anticuerpo de virus del síndrome respiratorio y reproductivo porcino

Especificación

PRRSV AB ELISA

Uso previsto: La reproducción y respiratoria porcina

El kit de detección ELISA de anticuerpos del virus del síndrome es para la determinación del anticuerpo PRRSV específico en el suero de cerdo in vitro. La prueba se utiliza para evaluar el vacunado desde

inmunización con reproducción porcina y

Vacuna contra el virus del síndrome respiratorio de granjas de cerdos.

Muestra: suero

Materiales proporcionados:

Procedimientos e interpretación de prueba

Paso 1 Procedimiento de prueba

1.1 Preparación de la solución de lavado

Working concentración wAshing Liquid:Antes de usar, la solución de lavado debe restaurarse a temperatura ambiente (20-25 grado) y agitarse uniformemente para hacerlo uniforme. Luego, diluya 20 veces la solución de lavado concentrada con agua purificada (por ejemplo, se agrega una solución de lavado concentrada de 5 ml al agua purificada de 95 ml), mezcle bien y el líquido de lavado diluido se puede almacenar en 2-8 durante 7 días.

1.2 Preparación de la muestra

① Se tomó sangre de animal entera, se centrifugó a 4000 rpm durante 10 minutos y se recogió sobrenadante. El suero también se puede coagular naturalmente sin hemólisis.

② Diluta la muestra de suero 1:50 (agregue 3UL Muestra de suero al diluyente de muestra 147UL) y mezcle bien.

Nota: Los controles negativos y positivos también necesitan diluir.

1.3 Procedimiento de prueba

① Tome la microplaca de la etiqueta de la enzima (según el número de muestras, se puede desmontar y usar varias veces), agregue 100ul del suero diluido al microplato de la etiqueta de la enzima, establezca dos pozos cada uno para muestras negativas y positivas, y agregue 100ul cada uno para negativo y controles positivos a la reacción bien respectivamente. Agite suavemente la muestra en el pozo, usando la película de la placa de sellado para cubrir la placa y incubar a 37 grados durante 30 minutos.

② Abra la película de la placa de sellado, agite la solución en la placa, agregue 300 µl de concentración de trabajo de lavado de líquido a cada pozo y luego deseche el líquido en el pozo. Repita los pasos anteriores 5 veces y finalmente se seca en un papel absorbente limpio.

③Add 100 µl de enzima conjugado a cada pocillo, cubra la placa e incubate a 37 grados durante 45 minutos.

④ Abra la película de la placa de sellado, agite la solución en la placa, agregue 300 µl de concentración de trabajo de lavado de líquido a cada pozo y luego deseche el líquido en el pozo. Repita los pasos anteriores 5 veces y finalmente se seca en un papel absorbente limpio.

⑤Add de una solución de sustrato de 100 µl a cada pozo, cubra la placa e incube durante 10 minutos a 37 grados de la luz.

⑥Add 50 µl de solución de parada a cada pocillo y determine el resultado en 5 minutos.

Paso 2 Interpretación de resultados

El valor OD450 de cada pozo se leyó en el lector de microplacas {{1 1}}} del pozo.

2.1 Validación

El valor promedio de OD450 nm del control negativo fue<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Método de cálculo

Para cada muestra, calcule el S/P de la siguiente manera utilizando la muestra corregida y los valores de control:

2.3 Interpretación de resultados

Cuando s/p<0.46, it is judged as negative.

Cuando S/P mayor o igual a 0. 56, se juzga como positivo.

Cuando 0. 46 menos o igual a S/P<0.56, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

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